Secrete-Pair? Dual Luminescence Assay Kit
產(chǎn)品優(yōu)勢
活細胞分析:
分泌型GLuc和SEAP
無需裂解細胞
實驗條件更靈活:
根據(jù)不同情況提供兩種用于Gluc活性分析的緩沖液
使用穩(wěn)定活性緩沖液可以在實驗開始10分鐘內(nèi)保證90%以上的信號,并能延長發(fā)射光的半衰期30分鐘以上
靈敏度高的緩沖液可以檢測低表達量的GLuc
實時研究:
快速獲得實驗數(shù)據(jù)
與實時活性研究類似
雙報告系統(tǒng)檢測:
檢測GLuc和SEAP
實現(xiàn)轉(zhuǎn)染標準化,可用于樣本間的比較
高通量兼容:
快速簡便的分析模式
可檢測大量樣品
Secrete-Pair? Dual Luminescence Assay Kit
Secrete-Pair? Dual Luminescence Assay Kit用于檢測雙報告系統(tǒng)中Gaussia Luciferase (GLuc)和Secreted Alkaline Phosphatase (SEAP)的活性。GLuc和SEAP都是分泌型蛋白,無需裂解細胞就能從培養(yǎng)基中獲得實驗樣本。
試劑盒提供兩種用于Gluc分析的緩沖液。Buffer GL-S含有穩(wěn)定劑,彌補了Gluc信號快速衰退的缺點,可用于穩(wěn)定活性分析。Buffer GL-H適用于檢測低表達量的Gluc活性,可以提供更高的靈敏度。
試劑盒能檢測雙報告信號并能對轉(zhuǎn)染標準化。標準化的Gluc活性可通過與未轉(zhuǎn)染的空白樣本比較獲得。
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Secrete Pair? Gaussia Luciferase Assay Kit
Secrete Pair? Gaussia Luciferase Assay Kit只能用于檢測Gaussia luciferase。
Secrete Pair kits可與 GLuc-ON?啟動子報告克隆和miTarget? miRNA 3′ UTR克隆配套使用。
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操作流程
Figure 1.不同緩沖體系中GLuc的信號穩(wěn)定性比較。細胞轉(zhuǎn)染人類Gluc報告基因克隆后收集細胞培養(yǎng)物,每個反應10μl。根據(jù)試劑盒的實驗步驟進行操作,對每個試劑盒中兩種緩沖體系進行測試,獲得的信號百分比(Y軸)作為信號穩(wěn)定性的指標。實驗結(jié)果如圖所示,在兩種試劑盒中(Secrete-Pair和競爭者Gaussia luciferase assay kit),含有穩(wěn)定劑(-S)的緩沖體系中Gluc的活性比不含穩(wěn)定劑(-H)的緩沖體系中穩(wěn)定。不僅如此,Secrete-Pair試劑盒緩沖體系中Gluc信號比競爭者試劑盒中穩(wěn)定性更高(實驗開始10分鐘內(nèi)近90%的信號可被捕獲)。
Figure 2. GLuc和SEAP分析。細胞轉(zhuǎn)染GLuc-SEAP雙報告基因克隆后收集細胞培養(yǎng)物,每個反應10μl。反應初期,GL-H緩沖液中wtGLuc活性比GL-S緩沖液中高3-5倍。但GL-S緩沖液中GLuc活性更穩(wěn)定。