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產(chǎn)品信息
相關(guān)產(chǎn)品
All-in-One? qPCR Mix and Validated Primers
All-in-One qPCR mix試劑與基因特異引物在通用的qPCR反應(yīng)條件下配套使用，即可獲得可靠的實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)。兩種產(chǎn)品經(jīng)共同開(kāi)發(fā)并進(jìn)行一體化優(yōu)化，表現(xiàn)出了如您所期望的、無(wú)需任何高成本的全范圍優(yōu)勢(shì)。
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產(chǎn)品優(yōu)勢(shì)
均一化的反應(yīng)條件縮短實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)時(shí)間，更早提交論文
高擴(kuò)增效率和靈敏度（甚至是低豐度基因）意味著每次實(shí)驗(yàn)中的可靠定量
無(wú)非特異性擴(kuò)增和二聚體，確?？芍貜?fù)性和數(shù)據(jù)可靠性
All-in-One qPCR mix使用高保真熱啟動(dòng)酶、經(jīng)過(guò)優(yōu)化的反應(yīng)緩沖液和高質(zhì)量dNTPs，能夠使低豐度RNA（cDNA）或DNA進(jìn)行特異的、靈敏的擴(kuò)增。
圖1.用梯度稀釋的質(zhì)粒DNA（5×106至5個(gè)分子）做標(biāo)準(zhǔn)曲線來(lái)評(píng)估All-in-One? qPCR Mix的擴(kuò)增效率和檢測(cè)靈敏度。如擴(kuò)增曲線和熔解曲線所示，All-in-One? qPCR Mix可擴(kuò)增低至5個(gè)分子的模板（質(zhì)粒DNA）說(shuō)明了擴(kuò)增和檢測(cè)的高靈敏度。
All-in-One 編碼基因驗(yàn)證引物
使用復(fù)能基因精確的qPCR試劑產(chǎn)品可消除繁冗的調(diào)整和優(yōu)化過(guò)程。只需選擇All-in-One驗(yàn)證引物即可開(kāi)始。
All-in-One人、小鼠或大鼠的qPCR反應(yīng)特異引物由專利算法設(shè)計(jì)，并為準(zhǔn)確定量而進(jìn)行了驗(yàn)證。驗(yàn)證結(jié)果包括熔解曲線，以保證擴(kuò)增正確靶DNA序列（見(jiàn)圖2.）。
與基于SYBR? Green I的All-in-One qPCR Mix試劑配套使用，All-in-One驗(yàn)證引物在qPCR定量實(shí)驗(yàn)中表現(xiàn)出可靠、可重復(fù)的高效性。
圖2. 45對(duì)基因特異引物經(jīng)過(guò)實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證均產(chǎn)生單一擴(kuò)增產(chǎn)物，融解曲線均呈單一銳鋒，電泳條帶均呈單一條帶，且與目標(biāo)基因相符。由10種人組織（肺、肝、睪丸、卵巢、脾、腦、胎盤、胰、心和乳腺）混合樣本的總RNA經(jīng)逆轉(zhuǎn)錄形成的cDNA作為引物驗(yàn)證的模板。qPCR反應(yīng)由終濃度0.2 uM的引物和All-in-One qPCR Mix配合完成。使用Bio-Rad iQ5 qPCR儀器，在95°C預(yù)變性10分鐘后，緊接著40個(gè)PCR循環(huán)（95°C變性10秒，60°C退火20秒鐘，72°C延伸15秒），最后一個(gè)循環(huán)后設(shè)置72至95°C的熔解曲線檢測(cè)程序。擴(kuò)增曲線、熔解曲線和瓊脂糖凝膠電泳圖如圖所示（驗(yàn)證的陽(yáng)性結(jié)果見(jiàn)奇數(shù)泳道，陰性對(duì)照結(jié)果（NTC）見(jiàn)偶數(shù)泳道）。
注釋：1.以上無(wú)非特異性擴(kuò)增和二聚體的驗(yàn)證結(jié)果均建立于本公司配套試劑產(chǎn)品和反應(yīng)體系之上。2.以上驗(yàn)證引物包括人、小鼠和大鼠，如需其他物種請(qǐng)咨詢。